Cytotoxine vacuolante du lait humain Les anticorps anti-immunoglobuline A modifient l’infection par Helicobacter pylori chez les enfants gambiens

Nous avons recueilli des données, y compris les poids, les résultats des tests d’haleine, et la présence mensuelle de l’immunoglobuline spécifique de la cytotoxine A spécifique du gène maternel et de la cytotoxine vacuolaire maternelle chez les mères et les nourrissons en Gambie. résultats négatifs au test d’urée, et% ont eu des résultats positifs La perte de poids associée à la colonisation par Helicobacter pylori était limitée aux enfants dont les mères ne produisaient pas d’anticorps anti-vacuolating cytotoxin A dans leur lait P =, par test t

Nous avons montré que les anticorps IgA du lait maternel dirigés contre l’uréase bactérienne retardent la colonisation par Helicobacter pylori chez les nourrissons en Gambie , une population dont la colonisation précoce est associée à une entéropathie et à un retard de croissance . une hypochlorhydrie gastrique transitoire induite par H pylori peut prédisposer les nourrissons à des infections entériques récidivantes , mais d’autres mécanismes peuvent être impliqués Les produits H pylori associés à la virulence, en particulier ont suscité de nombreuses recherches: la cytotoxine vacuolante A VacA et le produit de la cytotoxine Le gène associé CagA Les deux pourraient induire des lésions épithéliales et ainsi initier le développement de l’entéropathie chez les nourrissons gambiens. Il a été démontré que les allèles sm de type signal de VacA ont des propriétés entérotoxinogènes in vitro et sur des modèles animaux CagA induit des lésions épithéliales un système de sécrétion de type IV et une phosphorylation médiée d’un grand nombre de protéines de signalisation intracellulaire via une phosphatase Src Nous avons cherché à démontrer que les anticorps dirigés contre CagA et VacA chez les mères gambiennes pouvaient influencer la croissance des enfants exposés aux H pyloriMethods. échantillons prélevés dans un gisement de cohorte précédemment signalé y , qui a eu lieu à la station de recherche du Medical Research Council à Keneba, en Gambie, dans un village d’agriculteurs de subsistance ruraux. Tous les enfants nés pendant une période mensuelle et leurs mères ont été recrutés. travailleurs Les protocoles d’étude ont été approuvés par le Joint Medical Research Council et le Comité d’éthique du gouvernement gambien, ainsi que par une réunion d’anciens du village. Quatre-vingt et un nourrissons sont nés d’août à octobre; Tous les mois, les mères ont prélevé un échantillon de lait de chaque sein par expression manuelle avant de nourrir leurs enfants. De plus, des échantillons de sang capillaire ont été prélevés sur Le temps de la mère A partir de l’âge de quelques semaines, des tests respiratoires C-urée ont été effectués sur les enfants, selon un protocole précédemment décrit et validé Le poids de chaque nourrisson a été enregistré au moment où chaque test respiratoire a été effectué séparément Ces données ont été exprimées en poids z pour l’âge, comparées aux normes du Centre national de la statistique de la santé. Les échantillons de lait ont été congelés à h de la collecte, stockés à – ° C, et transporté à l’état congelé au Royaume-Uni pour analyse. Avant la réalisation du test, la phase aqueuse a été séparée des débris cellulaires et de la ayer, puis absorbé à ° C pendant une nuit contre des anticorps monoclonaux contre l’antigène Lewis b Alpha Laboratories et l’antigène brut Campylobacter jejuni Des laits absorbés ont été utilisés dans les dosages à une concentration finale de: Anticorps recombinants CagA et VacA, caractérisés et décrits ailleurs [, ], ont été enduits sur des plaques de dosage dans du tampon carbonate-bicarbonate à une concentration de μg de protéine par ml. Des dosages d’IgA spécifiques du lait et des taux sériques spécifiques d’IgG chez les mères ont été réalisés, comme décrit ailleurs. permettant la comparaison de variables continues, ou le cas échéant, la conversion en valeurs binaires, comme décrit ci-dessous. Une régression simple a été utilisée pour comparer des variables continues. Des tests t non appariés ont été utilisés pour évaluer les différences de valeurs moyennes entre groupes de résultats normalement distribués. relations entre les variables catégorielles Toutes les analyses ont été effectuées à l’aide du logiciel SPSS, versi sur les résultats de SPSS Seuls des volumes limités d’échantillons de lait restaient après des analyses précédentes, qui avaient démontré que, bien que les taux d’anticorps spécifiques du lait varient pendant toute la lactation, les changements dans les taux d’anticorps maternels pendant les premières semaines de lactation étaient faibles. Parmi ceux-ci,% présentaient des résultats séquentiels d’analyse d’urée négative de semaines à semaines. Nous avons classé ces nourrissons comme n’ayant pas été exposés à H pylori; le% restant avait un résultat positif au test d’haleine et a été classé comme ayant été exposé à H pylori. D’autres détails sur les résultats des tests respiratoires d’urée dans cette cohorte d’enfants sont décrits ailleurs Toutes les mères étaient H pylori IgG séropositives Réactivités IgA contre CagA dans une distribution essentiellement normale avec un rapport de densité optique ± SD moyen de ± chiffre Aucune différence dans les niveaux d’anticorps CagA du lait maternel entre les enfants non exposés au ratio de densité optique moyen H pylori, ± et la densité optique moyenne restante rapport, ±

Figure Vue largeDownload slideDistribution des résultats du rapport de densité optique mesurés par ELISA pour des anticorps IgA spécifiques dans le lait maternel contre la cytotoxine VacA vacuolante; double groupe de résultats et gène associé à la cytotoxine CagA; une seule grappe de résultatsFigure View largeTélécharger une diapositiveDistribution des résultats du rapport de densité optique mesurés par ELISA pour des anticorps IgA spécifiques dans le lait maternel contre la cytotoxine VacA vacuolante; double groupe de résultats et gène associé à la cytotoxine CagA; grappe unique de résultats Les anticorps anti-VacA du lait maternel ont été distribués en grappes Figure 1 Les nourrissons en grappes étaient étroitement répartis autour du rapport de densité optique vierge, et un deuxième groupe présentait une gamme de réactivités correspondant approximativement à une distribution normale positivement asymétrique Sur la base de cette distribution bimodale apparente, nous avons classé ces groupes comme anticorps VacA négatif et anticorps VacA positif, respectivement. Seulement% des enfants non exposés à H pylori provenaient d’une mère dont le lait était positif à l’anticorps VacA. d’âge, le poids des filles variait de kg à kg poids moyen pour l’âge, kg; z score = kg Poids des garçons allant de kg à kg poids moyen pour l’âge, kg; z score = kgLe taux d’anticorps CagA dans le lait maternel n’était pas lié à la variation du score z du poids du nourrisson pour l’âge entre et semaines d’âge R =; P = Il y avait, cependant, une association entre l’augmentation du gain de poids chez le nourrisson et la présence d’anticorps VacA du lait maternel P =, par test t; figure Perte de poids associée à la colonisation précoce de H pylori dans cette étude s’élevant à & gt; z scores de différence dans les valeurs moyennes, par rapport aux pairs non-harmonisés; ~ Kg à cet âge était réservé aux enfants dont les mères ne produisaient pas d’anticorps anti-VacA dans leur lait

Figure Vue largeDownload slideChangement du score z du poids pour l’âge chez les nourrissons exposés à Helicobacter pylori dont les mères avaient des résultats négatifs au test d’anticorps anti-cytotoxine A VacA, les enfants exposés à H pylori dont les mères avaient des résultats positifs au test VacA, chez les enfants exposés à Helicobacter pylori dont les mères avaient des résultats négatifs au test de dépistage des anticorps anti-cytotoxine A VacA chez les enfants, et les enfants qui n’étaient pas exposés à l’UBT. Les anticorps IgA spécifiques au VacA mais non au CagA dans le lait maternel ont significativement réduit la réduction souvent observée de la croissance du nourrisson dorsal. chez les enfants gambiens colonisés avec H pylori Enfants exposés à H pylori par les mères sans ant Anta Les ibodies dans leur lait ont montré une diminution du gain de poids entre et des semaines, comparé à leurs pairs, ce qui correspond à un risque accru de morbidité et de mortalité toutes causes confondues dans cette population. Ces données étendent nos conclusions précédentes sur les effets cliniques spécifiques anticorps anti-H pylori chez les nourrissons Nous avons déjà démontré que des IgA anti-sécrétion spécifiques retardent la colonisation par H pylori chez les nourrissons ; En effet, nous avons principalement détecté des IgA anti-VacA chez les mères d’enfants exposés à H pylori. Bien qu’il soit possible que ces anticorps prédisposent les enfants à la colonisation, il est possible que des anticorps spécifiques du VacA soient détectés. Il est plus probable que les mères subissent une augmentation des anticorps spécifiques après la colonisation de H pylori par leurs enfants, comme cela a été observé avec les anticorps du lait contre l’uréase recombinante , ce qui implique une augmentation de l’exposition aux antigènes entériques. nouveau-né colonisé, avec circulation entéro-mammaire conduisant à une excrétion accrue d’anticorps spécifiques du laitNous n’avons détecté aucun effet clinique de l’IgA anti-CagA dans le lait maternel, mais l’IgA anti-VacA peut améliorer le retard de croissance associé à la colonisation précoce des nourrissons. Etudes gambiennes Il est donc possible que VacA joue un rôle dans la Le développement de l’entéropathie caractéristique de cet échec de croissance Bien que VacA soit produit par H pylori dans l’estomac, il peut exercer un effet sur des régions plus distales de l’intestin. Des études in vitro suggèrent que VacA doit être activé dans un pH acide et transférer Dans les épithéliums de l’estomac et de l’intestin grêle, VacA produit un ballonnement acide du réticulum endoplasmique et une perméabilisation de la membrane cellulaire d’une manière indépendante des effets cytopathogènes observés . Cependant, les chiens ont des effets toxiques sur l’épithélium hôte. Diarrhée sécrétoire développée lorsqu’on administre de grandes doses entériques de VacA On a montré que la diarrhée purgative extrême augmente l’excrétion de H pylori infectieuse , et il est possible que le développement de l’entéropathie avec diarrhée sécrétoire augmente la transmission fécale et / ou orale du Chez les nourrissons de cette population, nos données suggèrent que VacA pourrait jouer un rôle important dans l’expression de Pendant la période de vulnérabilité, l’immunité passive contre H pylori peut être particulièrement avantageuse pour les nourrissons. Il est donc probable que la capacité des mères gambiennes à produire des anticorps spécifiques du lait dirigés contre les principaux déterminants de la virulence bactérienne, tels que VacA, est d’une importance majeure pour permettre à leurs bébés de tirer le meilleur parti de l’alimentation au cours des premiers mois de la vie

Remerciements

Nous remercions Chiron Siena pour son aimable don d’antigènes Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits