Éclosion de campylobactériose associée à la consommation de pois crus

Contexte Campylobacter jejuni est une cause majeure de gastro-entérite aiguë dans le monde et la plupart des cas sont identifiés comme des événements sporadiques plutôt que comme des foyers d’épidémies reconnues. Nous rapportons les résultats d’une épidémie importante de campylobactériose avec des implications générales pour la sécurité des produits frais. Déterminer la source de la flambée et améliorer la surveillance pour identifier d’autres cas Les échantillons cliniques et environnementaux ont été testés pour Campylobacter, et les isolats ont été sous-typés par électrophorèse sur gel à champ pulsé. PFeringesults Par surveillance de routine, nous avons identifié des cas d’infection confirmés en laboratoire. consommés par% des patients et par% des participants du groupe témoin, étaient associés à un odds ratio ajusté à la maladie:; P & lt; D’autres patients confirmés en laboratoire qui ont déclaré avoir mangé des pois crus quelques jours après l’apparition de la maladie ont été identifiés grâce à une surveillance accrue. Dans tous les cas, les cas ont été hospitalisés et le syndrome de Guillain-Barré s’est développé; Des échantillons prélevés dans l’environnement ont été positifs pour des échantillons de cjéjunocrane-fèces et des échantillons de pois. Nous avons identifié des profils uniques de PFGE SmaI-KpnI parmi les isolats cliniques; Ces profils combinés de PFGE identifiés dans des isolats humains étaient indiscernables des profils PFGE identifiés dans des échantillons environnementauxConclusions Cette étude a établi un lien rare confirmé en laboratoire entre une épidémie de campylobactérie et une source environnementale et identifié les oiseaux sauvages comme une source non reconnue de contamination des produits.

Campylobacter jejuni, un pathogène zoonotique, est l’une des causes bactériennes les plus communes des maladies diarrhéiques aux États-Unis, causant un million d’infections par an Campylobacteriosis se caractérise par diarrhée aqueuse et souvent sanglante, crampes abdominales, fièvre, nausées, et vomissements Les symptômes surviennent – jours après l’infection et persistent généralement pendant – semaines Bien que rares, certaines séquelles chroniques ont été associées à la campylobactériose, y compris le syndrome de Guillain-Barré et l’arthrite réactionnelle La plupart des cas de campylobactériose sont identifiés comme des événements sporadiques. La maladie est généralement associée à une exposition à de la nourriture ou de l’eau contaminée C jejuni est un organisme exigeant qui nécessite une atmosphère microaérobie et une température d’incubation de 0 ° C pour la croissance. Les organismes sont rapidement inactivés par la dessiccation et l’oxygène atmosphérique. en temps de survie limité en dehors d’un animal hôte s, donc, obtenir rarement la confirmation en laboratoire d’un véhicule impliqué pour les éclosions de campylobactériose Pendant -, une moyenne de portée, – des cas de campylobactériose par an ont été signalés à la section Alaska de l’épidémiologie SOE, données non publiées. a eu lieu dans des cas de C jejuni confirmés en laboratoire Une enquête sur cette éclosion a révélé une forte association épidémiologique avec des odds ratio appariés de pois cultivés localement; % intervalle de confiance [CI], -; données non publiées, SOE; En août, d’autres cas confirmés en laboratoire ont été signalés. Des isolats de tous les cas ont été soumis à un sous-typage moléculaire par pulsation. PFGE au Laboratoire public de santé publique de l’Alaska ASPHL En août, le personnel des SOE a été informé que les isolats étaient indiscernables par PFGE. Nous avons immédiatement entrepris une enquête pour déterminer la source et l’étendue de l’épidémie et empêcher toute transmission ultérieure.

Méthodes

Étude initiale de cas et étude de cas-témoins

Un avis de santé a été publié en septembre pour informer les fournisseurs de soins de santé de l’Alaska d’une éclosion potentielle de campylobactériose, pour encourager la déclaration et pour demander que des échantillons de selles prélevés sur des patients cliniquement compatibles soient envoyés à ASPHL pour être testés. communiqué de presse pour alerter le public de l’éclosion; Nous avons effectué une étude de cas pour déterminer la source de l’éclosion. Un cas a été défini comme une infection à Campylobacter jejuni confirmée en laboratoire et diagnostiquée entre août et septembre chez une personne. vivant dans le centre-sud de l’Alaska Nous avons sélectionné des participants témoins asymptomatiques pour chaque cas et les avons comparés par groupe d’âge -, -, – et ≥ y et l’emplacement par numérotation progressive et séquentielle avec le numéro de téléphone du patient comme référence. un questionnaire soit par téléphone ou en personne aux patients de cas et aux participants de contrôle; l’information démographique, les caractéristiques de la maladie, les antécédents d’exposition alimentaire et environnementale et les pratiques de préparation des aliments ont été consignés

Surveillance améliorée et recherche active de cas

En septembre, après la conclusion de l’étude cas-témoins, SOE a publié un deuxième communiqué de presse et alerte de santé publique pour faciliter la surveillance de la campylobactériose et la recherche active de cas, afin d’estimer l’ampleur de l’éclosion de pois. , un cas était défini comme une maladie chez une personne qui avait présenté un ou plusieurs épisodes de diarrhée aqueuse en quelques jours après avoir consommé des pois crus cultivés en Alaska et dont le début des symptômes s’est produit entre août et septembre. Les cas confirmés en laboratoire identifiés en août-septembre et qui ont été inclus dans l’étude cas-témoins étaient admissibles à l’inclusion s’ils répondaient au cas de surveillance renforcée. définition

Enquête environnementale

Les agents d’inspection de la salubrité des aliments du Département de la conservation de l’environnement de l’Alaska ont retracé les pois mangés par les patients auprès des fournisseurs et les procédures de récolte, de transformation et d’emballage ont été examinées au cours d’une enquête sur la ferme concernée.

Enquête de laboratoire

Entre août et septembre, des échantillons de selles ont été prélevés sur des patients, expédiés à ASPHL et testés pour Campylobacter avec des méthodes standard Des isolats présomptifs de Campylobacter ont été confirmés comme C jejuni par des méthodes phénotypiques standard – tests d’hydrolyse de Gram, oxydase, catalase et hippurate [ Pendant cette période, des isolats présumés de Campylobacter ont également été reçus à l’ASPHL d’autres laboratoires en Alaska pour confirmation de culture et PFGEDuring the Farm Inspection environnementale, des échantillons provenant des aliments, de l’eau et des surfaces de traitement ont été prélevés pour vérifier la présence d’échantillons fécaux Campylobacter Crane Les échantillons ont été envoyés aux Laboratoires Silliker et aux Centres de contrôle et de prévention des maladies CDC National Campylobacter et Helicobacter Reference Laboratory pour analyse. Les échantillons envoyés à Silliker ont été testés avec des standards. Les méthodes d’isolement de Campylobacter décrivent Les isolats présumés de Campylobacter ont ensuite été envoyés au CDC pour confirmation et sous-typage des espèces. Les échantillons de selles de grue envoyés directement au CDC ont été traités avec les méthodes d’isolation suivantes: placage direct sur sélectif. CVA de milieu sanguin; Becton Dickinson, avec des plaques incubées en microaérobie pendant des heures à ° C; filtration sur milieu non sélectif cerveau-infusion cerveau-coeur [BHI] avec% vol / vol de sang de lapin, avec incubation de milieux à ° C pendant plusieurs jours dans des conditions microaérobies; et enrichissement en différents bouillons de bouillon d’enrichissement de Preston [PEB] et de bouillon d’enrichissement de Bolton [BEB]; PEB a été incubé à ° C pendant des heures dans des conditions microaérobies, et BEB a été incubé pendant des heures à ° C, suivi par une incubation supplémentaire à ° C pendant des heures Tous les bouillons ont été inoculés sur Campylobacter agar sans sang modifié charbon céfoperazone désoxycholate agar, Oxoid, CM SR à des heures et incubées à ° C pendant des heures dans des conditions microaérobiesNous avons recueilli des prélèvements de colonies dans chaque échantillon Campylobacter positif Tous les isolats présumés de Campylobacter ont été cultivés à ° C pendant des heures sur de la gélose BHI avec% vol / vol de sang de lapin dans des conditions microaérobies. Procédures standard Préparation de l’ADN de C jejuni, analyse de macrorestriction en utilisant les enzymes de restriction SmaI et KpnI, et réalisées sur tous les isolats de C jejuni humains et environnementaux comme décrit précédemment Les souches de cette épidémie sont incluses dans une évaluation des utilité d’une méthode expérimentale de sous-typage connue sous le nom de MLST (multilocus sequence typing); les résultats de cette évaluation seront publiés ailleurs

Analyses statistiques

Nous avons identifié des facteurs de risque par analyse de régression logistique multiple Nous avons créé des modèles avec la procédure de régression de Cox PROC PHREG dans le logiciel statistique SAS, la version SAS Institute Les odds ratios et leurs IC% ont été calculés pour tous les aliments et expositions environnementales inclus dans le questionnaire Les facteurs associés aux valeurs P statistiquement significatives sur l’analyse univariée et par groupe d’âge ont été inclus dans un modèle multivarié. La signification statistique a été définie comme une valeur de P & lt;

RÉSULTATS

Étude de cas-contrôle

Les participants à l’étude cas-témoins comprenaient des patients ayant présenté une infection à C jejuni confirmée en laboratoire et des participants au contrôle communautaire. Les caractéristiques démographiques et cliniques des cas cliniques sont résumées dans le tableau Cas-les patients étaient significativement plus susceptibles que les témoins de Les patients étaient moins susceptibles que les participants témoins d’avoir consommé du radis ou du hamburger mangé% des cas de patients mangeant des pois crus rapportés au% des participants du groupe témoin dans un modèle de régression logistique multiple qui incluait le groupe d’âge et tous statistiquement facteurs de risque significatifs identifiés à partir de l’analyse univariée, y compris la consommation de pois crus, hamburger, ou radis cru et le contact avec les animaux de compagnie, la consommation de pois crus était le seul facteur de risque statistiquement significatif pour l’odds ratio ajusté [aOR]:; % CI, –

Tableau Caractéristiques démographiques et cliniques des patients associés à une infection à Campylobacter jejuni confirmée en laboratoire, diagnostiquée en août – septembre dans le centre-sud de l’Alaska n = Variable Pourcentage de valeur Âge-y, intervalle médian – Sexe masculin-non / total non% / Race-non / total non% Caucasien / Alaska Autochtone / Asiatique / Recherché soins médicaux pour maladie-non / total non% / Hospitalisé pour maladie-non / total non% / Symptômes-non / total non% Diarrhée / Crampes / Nausée / Fièvre / Ballonnement / Poids perte / Vomissements / Diarrhée sanglante / Variable Valeur pourcentage Age-y, intervalle médian – Sexe masculin-non / total non% / Race-non / total non% Caucasien / Alaska Autochtone / Asiatique / Médicament recherché pour maladie-non / total non % / Hôpital ized pour la maladie-non / total non% / Symptômes-non / total non% Diarrhée / Crampes / Nausée / Fièvre / Ballonnement / Perte de poids / Vomissements / Diarrhée sanglante / View Large

Tableau Sélection des expositions signalées par les patients associés à une infection à Campylobacter jejuni confirmée en laboratoire et à des participants témoins appariés selon l’âge et la communauté identifiés en août et septembre chez les patients du centre-sud de l’Alaska n = sujets témoins = analyse univariée b analyse multivariée Variable non / total non% non / total non% odds ratio% CI valeur p valeur ajustéec% CI valeur P Expositions environnementales Manipulation des aliments / / -∞ Contact avec des animaux / / – – Contact avec le bétail / / – Visite à la ferme / / – Natation dans un lac ou une rivière / / – Camping / / – Eau potable du lac ou de la rivière / / – Produits alimentaires consommés Légumes crus Laitue / / – Pois / / – & lt; – & lt; Épinards / / – Tomates / / – Concombre / / – Céleri / / – Radis / / – – Oignon / / – Carottes / / – Brocoli / / – Choux / / – Autres aliments Oeufs crus ou insuffisamment cuits / / – Lait non pasteurisé / / undefined – Hamburger / / – – Poulet rare ou insuffisamment cuit / / – Viande rare ou insuffisamment cuite / / – Patients n = Participants de contrôlean = Analyse univariéeb Analyse multivariée Variable non / total non% non / total non% odds ratio% CI Valeur P ajustéec OR % CI P value Expositions environnementales Manipulation des aliments / / -∞ Contact avec des animaux / / – – Contact avec le bétail / / – Visite de la ferme / / – Natation dans un lac ou une rivière / / – Camping / / – L’eau potable du lac ou d’une rivière / / – Les produits alimentaires consommés légumes crus / laitue / – Pois / / – & lt; – & lt; Épinards / / – Tomates / / – Concombre / / – Céleri / / – Radis / / – – Oignon / / – Carottes / / – Brocoli / / – Choux / / – Autres aliments Oeufs crus ou insuffisamment cuits / / – Lait non pasteurisé / / undefined – Hamburger / / – – Poulet rare ou insuffisamment cuit / / – Boeuf rare ou insuffisamment cuit / / – NOTE CI, intervalle de confiance; OU, les participants odds ratioaControl sélectionnés grâce à la numérotation progressive et séquentielle, et appariés sur l’analyse par groupe d’âge et par localisationbMatched-pair; Les limites de confiance en% sont des intervalles exacts pour le maximum de vraisemblance.

Surveillance améliorée

Dans l’ensemble, les personnes répondaient à la définition de cas de surveillance améliorée. Figure Les âges des patients variaient entre les années médianes: y En plus de la diarrhée, les symptômes comprenaient: crampes abdominales%, nausées%, fièvre%, vomissements% et diarrhée sanglante% durée médiane de la diarrhée , – d Tous sauf les patients étaient des résidents de l’Alaska; les patients étaient hospitalisés, – d; médiane, le syndrome de Guillain-Barré s’est développé chez les patients après l’apparition des symptômes; ce patient a été hospitalisé dans une unité de soins intensifs pendant plusieurs jours, a nécessité une ventilation mécanique et a dû subir une rééducation neurologique après son congé. Aucun autre patient n’a eu besoin de soins intensifs, et aucun n’est décédé

Figure View largeTélécharger slideCases de campylobactériose associée à la consommation de pois crus dans le centre-sud de l’Alaska en n =, selon la date d’apparition des symptômesFigure View largeTélécharger slideCases de campylobactériose associée à la consommation de pois crus dans le centre-sud de l’Alaska en n =, selon date d’apparition des symptômes

Enquête environnementale

Les pois mangés par les patients ont été retrouvés à la ferme A, la seule ferme en Alaska connue pour traiter et distribuer des pois décortiqués à des fins commerciales. acres de pois et commercialisé environ livres de produits décortiqués par jour pour & gt; ans, à partir de la mi-juillet ou du début août chaque année Ferme A sacs empaquetés et étiquetés avec des instructions de blanchiment avant congélation L’étiquette n’incluait pas les risques associés à la consommation de fruits non cuits ou recommandait de laver les pois avant de les consommer. en quantités plus faibles pour les ventes aux consommateurs ou vendus les pois comme des produits prêts-à-manger sur les marchés des agriculteurs locaux Aucune étape d’abattage bactérien n’a été effectuée par les vendeurs. Les pois ont été récupérés auprès des fournisseurs pour des tests en laboratoire. chlore résiduel dans l’eau de traitement des pois, plomberie inadéquate menant à la zone de traitement et dans celle-ci, surfaces de travail inadéquates pour le traitement et portes et entrées extérieures laissées ouvertes toute la journée Le propriétaire de la ferme A a signalé que Grues canadensis visitait des champs de pois tous les jours, en commençant aux environs de la récolte et en continuant jusqu’à la mi-septembre ou jusqu’à ce que le temps atteigne des températures glaciales rr, communication personnelle, septembre Des grues ont été observées en train de brouter et de déféquer dans les champs de pois pendant la récolte. La ferme A a cessé volontairement ses activités en septembre et les détaillants locaux ont retiré les pois restants de leurs étagères

Enquête de laboratoire

Parmi les personnes qui répondaient à la définition améliorée de surveillance,% présentaient des gastroentérites de type Cjejuni confirmées en laboratoire. Des isolats sous-typés provenant de patients par PFGE, qui identifiaient un SmaI unique, un KpnI unique et des profils uniques de PFGE SmaI-KpnI isolés. provenant d’un seul patient partageant le même schéma PFGE SmaI-KpnI Différentes souches de C jejuni ont également été isolées chez des membres de la même famille dans des ménages distincts. Entre août et septembre, les échantillons de personnes n’ayant pas déclaré consommer de pois crus étaient positifs pour C jejuni infection à ASPHL ou un autre laboratoire clinique Les isolats de ces patients ont été caractérisés par PFGE; profils de PFGE partagés SmaI-KpnI avec des isolats provenant de personnes ayant mangé des pois Dans l’ensemble, les isolats de C jejuni de patients ont été caractérisés par PFGE; SmaI unique, KpnI unique, et des patrons de PFGE uniques SmaI-KpnI ont été identifiés. Parmi ces isolats, appartenaient à des grappes de combinaisons de motifs SmaI-KpnI indiscernables. Figure En comparaison avec les schémas combinés PFGE SmaI-KpnI dans la base de données nationale PulseNet de PulseNet. ], tous les profils PFGE SmaI-KpnI, sauf ceux associés, identifiés dans cette éclosion étaient uniques; des profils de PFGE combinés ont été détectés dans le spécimen d’un patient de l’Alaska avant l’épidémie, et les autres profils de PFGE combinés ont été décrits dans PulseNet avant cette épidémie

Figure Vue largeDownload slideCluster Analyse des isolats de Campylobacter jejuni en Alaska groupés avec la méthode des groupes de paires non pondérés avec des moyennes arithmétiques des profils d’électrophorèse sur gel à champ pulsé Les profils représentent tous les isolats cliniques disponibles. Symboles indiquent des groupes d’isolats provenant de patients présentant des profils de PFGE et de KpnI PFGE indissociables, ≥% de fèces de pois et de grues de Sandhill isolent des patrons PFGE qui ne peuvent être distingués des isolats cliniques sont également illustrés par arrow Numéros d’accés, et sont des isolats en double pour le même patient électrophorèse en champ pulsé par électrophorèse en champ pulsé Asterisk indique des patients qui n’ont pas mangé de pois n = Figure Voir en grand formatTarifs de l’infection par Campylobacter jejuni en Alaska groupés avec la p Méthode des groupes d’air avec moyennes arithmétiques des profils d’électrophorèse en champ pulsé Les profils représentent tous les isolats cliniques disponibles de l’épidémie de Campylobacter recueillis en août-septembre dans le centre-sud de l’Alaska et analysés au Laboratoire de santé publique de l’Alaska. des isolats provenant de patients présentant des profils de PFGE indistincts SmaI et KpnI, ≥% de fèces de pois et de grues de Sandhill isolées Les profils PFGE qui ne peuvent pas être distingués des isolats cliniques sont également illustrés par des numéros d’accés, et sont des isolats en double pour le même PFGE. électrophorèse sur gel à champ pulsé Asterisk indique les patients qui n’ont pas mangé de pois n = Nous avons recueilli des échantillons environnementaux de la nourriture, de l’eau et des surfaces de traitement de la ferme A; Nous avons isolé C nijuni à partir d’échantillons de selles de grues et d’échantillons de pois Une autre espèce de Campylobacter, Campylobacter canadensis, a également été isolée des échantillons de selles de grues avec la méthode d’isolement par filtration seulement. ; Tous les profils PFGE combinés identifiés à partir d’échantillons environnementaux étaient uniques à PulseNet Lorsque les profils combinés PFGE SmaI-KpnI des isolats C jejuni humains et environnementaux ont été comparés, les sous-types PFGE obtenus à partir de personnes étaient indiscernables de les sous-types de PFGE obtenus à partir d’échantillons de pois de ferme A et d’échantillons de matières fécales de grue de ferme A de Sandhill, respectivement

DISCUSSION

t être coûteux ou difficile à mettre en œuvre avec succèsLes déficiences de traitement identifiées pendant l’enquête environnementale pourraient également avoir contribué à cette éclosion; par conséquent, on a conseillé à l’agriculteur d’installer des conduites d’eau potable de qualité alimentaire, un injecteur de chlore et une surface durable et lavable sur le mur adjacent à la chaîne de traitement; stocker le produit cru et fini dans des zones séparées pour éviter la contamination croisée; L’agriculteur a pris des mesures correctives et a accepté de se soumettre volontairement à des audits annuels pour démontrer le respect des bonnes pratiques agricoles et de manipulation recommandées par la FDA . Aucune augmentation des cas signalés de campylobacter Les épidémiologistes de la santé publique s’appuient souvent sur le PFGE pour identifier les épidémies et les expositions communes. Parce que de multiples souches de C jejuni colonisent les voies digestives des oiseaux, des éclosions communes de Campylobacter pourraient être manquées si les autorités sanitaires ne mènent pas d’enquêtes. des profils d’ECP correspondants Cette éclosion a été causée par des souches uniques de C jejuni et d’autres souches auraient pu être identifiées si davantage d’échantillons humains avaient été analysés. En outre, comme des échantillons environnementaux individuels donnaient naissance à différentes souches de C jejuni, des patients individuels étaient probablement infectés. & gt; Cette hypothèse est confirmée par notre identification des membres du ménage qui ont été testés positifs pour différentes souches de C jejuni Cependant, comme le protocole de laboratoire standard pour isoler Campylobacter à partir de spécimens humains implique la sélection d’un seul isolat de C jejuni par échantillon clinique, nous avons été incapables de déterminer si les patients avaient été infectés par plusieurs souches de C jejuni. Par conséquent, nous avons probablement manqué des occasions de fournir un lien moléculaire entre d’autres isolats cliniques et des isolats environnementaux. Heureusement, parce que des échantillons cliniques et environnementaux ont été obtenus rapidement, nous avons démontré que Cette épidémie de gastro-entérite à C jejuni était associée à la consommation de pois commerciaux contaminés par des excréments de grues. Elle a entraîné une morbidité considérable et souligne la nécessité de considérer les fèces d’oiseaux sauvages comme L’identification de ce nouveau véhicule alimentaire souligne la nécessité de mieux comprendre les écologies et les réservoirs de Campylobacter et d’autres pathogènes zoonotiques d’origine alimentaire, et de développer des mesures de contrôle supplémentaires pour prévenir ou réduire la contamination des produits frais cérébral. rapport sont ceux des auteurs et ne représentent pas nécessairement la position officielle des Centres pour le contrôle et la prévention des maladies Section d’épidémiologie de l’Alaska L Castrodale, D Fearey, E. Funk, SA Jenkerson, S. Layton, K Martinek, C Patterson, G Provo, B Smith, G Wilkinson; Municipalité d’Anchorage Services de santé et humains B Chandler, G Buckley, C Drake-Wilke, H Fallico, D Norris, R Rodriguez, W Walters; Département de conservation de l’environnement de l’Alaska M Hyre, M Tierney, B Gerlach, S Longan; Laboratoire de santé publique de l’État de l’Alaska L Lucher, C Ross, S. Smith; Département de la pêche et du gibier de l’Alaska M Petrula, T Rothe, Centre de recherche sur la faune de North Prairie G Kraypu; Centres de contrôle et de prévention des maladies F Angulo, D Bensyl, P Griffin, K Joyce, PSL Kwan, P Lafon, N Garrett, R Contributions de TauxeAuthor TJD et JBM ont eu un accès complet à toutes les données de l’étude et prennent la responsabilité de l’intégrité des données et de l’exactitude de l’analyse des données Concept et conception de l’étude: TJG, JBM; acquisition de données: T J G, C F, C X, R K, J P; analyse et interprétation des données: T J M, C F, C X, J P, S S, J B M; rédaction du manuscrit: T J M, J B M; révision critique du manuscrit pour un contenu intellectuel important: T J G, J B M, C F; analyse statistique: T J G; soutien administratif, technique ou matériel: C X, C F, J P, S S, R K; Supervision de l’étude: JB MRole du sponsor Les auteurs, et non les Centers for Disease Control and Prevention, étaient seuls responsables du concept et de la conception de l’étude, de l’acquisition des données, de l’analyse et de l’interprétation des données, de la rédaction et de la révision critique du manuscrit. analyse statistique, soutien administratif, technique et matériel, et supervision des études. Soutien financier Ce travail a été soutenu par l’Association internationale des centres de protection alimentaire pour le contrôle et la prévention des maladies, pour le TG; et la Division de la santé publique, Anchorage, Alaska Conflits d’intérêts potentiels: Tous les auteurs: aucun conflit Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués dans le section